Resumen

Las lipasas desempeñan un papel crucial en el metabolismo de los microbios, los hongos, las plantas y los animales, y en la química analítica se utilizan a menudo en la detección de grasas y triglicéridos. La determinación de la actividad de las lipasas también es importante en toxicología, cuando la actividad de las lipasas puede aumentar o disminuir por los organofosforados y otros pesticidas, y en medicina para el diagnóstico de las enfermedades del corazón. El método estándar para la determinación de la actividad de la lipasa se basa en la ruptura de los enlaces éster en un tampón de lipasa que contiene Tween. Nuestro objetivo era encontrar un método con una respuesta más rápida y sensible. Se sabe que la acetilcolinesterasa pertenece al mismo grupo de enzimas hidrolasas que las lipasas y que escinde el acetato de indoxilo, por lo que suponemos que el acetato de indoxilo podría reportar una reacción similar con la lipasa. Nuestro método se basa en el acetato de indoxilo como sustrato para la lipasa, donde el acetato de indoxilo es escindido por la lipasa a indoxilo y fracción de acetato y se crea el índigo azul. El método se optimizó para diferentes tiempos y cantidades de enzima y se comparó con el ensayo estándar de Tween. La curva de calibración medida en un tiempo de reacción de 20 minutos con 10 μl de lipasa exhibió los mejores parámetros analíticos, y mostró la respuesta de Michaelis-Menten con la constante de Michaelis-Menten igual a 8,72 mmol/l. El método basado en el acetato de indoxilo mostró una respuesta más rápida y sensible que el método estándar para la determinación de la actividad de la lipasa, por lo que tiene un gran potencial en la construcción de biosensores y podría ser utilizado en la industria, la medicina, la toxicología y la práctica común donde se necesita medir la actividad de las lipasas.

• Materias:Cinética química Química farmacéutica Análisis químico Método espectrofotométrico
• Subjects:Chemical kinetics Chemistry pharmaceutical Chemical test Spectrophotometric method
• Palabras claves:acetato de indoxilo, determinación de las actividades de la lipasa, lipasa, actividades de la lipasa, respuesta sensible, métodos estándar, grupo de hidrolasas, actividades de la lipasa, detección de la grasa, determinación de la lipasa
• Keywords:indoxyl acetate, lipase activities determination, lipase, lipase activities, sensitive response, standard methods, group of hydrolases, activities of lipase, detection of fat, determination of lipase