Resumen

En la era de la resistencia a los antibióticos, la proteína citoesquelética bacteriana MreB se presenta como una diana potencial para el desarrollo de nuevos antimicrobianos. Los tratamientos combinados de antibióticos clínicos con compuestos anti-MreB pueden ser candidatos prometedores para combatir la crisis de resistencia, pero también para preservar la potencia de muchos fármacos convencionales. Este estudio tenía como objetivo evaluar las actividades antibacterianas y antibiofilm sinérgicas del inhibidor de MreB clorhidrato A22 en combinación con varios antibióticos. Los valores de concentración inhibitoria mínima (CIM) de los compuestos individuales se determinaron mediante el método de microdilución en caldo frente a 66 aislados clínicos de bacterias Gram negativas. La sinergia se evaluó mediante el ensayo del tablero de ajedrez. Se calculó el índice de concentración inhibitoria fraccional para cada una de las combinaciones de A22 y antibióticos. La actividad bactericida de las combinaciones se evaluó mediante ensayos de curva de tiempo-muerte. La actividad antibiopelícula de las combinaciones más sinérgicas se determinó mediante tinción con violeta cristal, ensayo de metil tiazol tetrazolio y análisis de microscopía confocal de barrido láser. También se evaluó la actividad citotóxica y hemolítica combinada frente a células humanas. Según nuestros resultados, los aislados de Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli eran resistentes a los antibióticos convencionales en diversos grados. A22 inhibió el crecimiento bacteriano de forma dependiente de la dosis, con valores de CMI comprendidos entre 2 y 64 μg/mL. En los estudios de combinación, el sinergismo se produjo con mayor frecuencia con A22-ceftazidima y A22-meropemen contra Pseudomonas aeruginosa y A22-cefoxitina y A22-azitromicina contra Escherichia coli. No se observó antagonismo. En los estudios de tiempo-muerte, se observó sinergismo con todas las combinaciones previstas. Las combinaciones sinérgicas, incluso a las concentraciones más bajas ensayadas, fueron capaces de inhibir la formación de biopelículas y erradicar las biopelículas maduras en ambas cepas. No se observaron efectos citotóxicos ni hemolíticos de las mismas combinaciones hacia las células humanas. Los resultados del presente estudio corroboran investigaciones anteriores sobre el uso de MreB como nueva diana antibiótica. Los datos obtenidos amplían los conocimientos existentes sobre la actividad antimicrobiana y antibiopelícula del inhibidor A22, e indican que A22 puede servir como compuesto líder para estudiar el sinergismo potencial entre inhibidores de MreB y antibióticos en el futuro.

• Materias:Microbiología Bacteriología Propiedades farmacológicas Virología Biopelículas
• Subjects:Microbiology Bacteriology Pharmacological Properties Virology Biofilms
• Palabras claves:A22, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, actividad antibiopelícula, células humanas, inhibidor de MreB clorhidrato de A22, proteína citoesquelética bacteriana MreB, índice de concentración inhibitoria fraccional, ensayo de metil tiazol tetrazolio, método de microdilución en caldo.
• Keywords:A22, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, antibiofilm activity, human cells, MreB inhibitor A22 hydrochloride, bacterial cytoskeletal protein MreB, fractional inhibitory concentration index, methyl thiazol tetrazolium assay, broth microdilution method