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Isolation, Expression, and Promoter Analysis of GbWRKY2: A Novel Transcription Factor Gene from Ginkgo bilobaAislamiento, expresión y análisis del promotor de GbWRKY2: un nuevo gen factor de transcripción del Ginkgo biloba

Resumen

El factor de transcripción WRKY está implicado en múltiples actividades vitales, incluyendo el crecimiento y desarrollo de las plantas, así como en respuestas bióticas y abióticas. Identificamos 28 genes WRKY a partir de los datos del transcriptoma de Ginkgo biloba de acuerdo con los dominios WRKY conservados y la estructura de los dedos de zinc y seleccionamos tres genes WRKY, que son GbWRKY2, GbWRKY16 y GbWRKY21, para el análisis del patrón de expresión. GbWRKY2 se expresó preferentemente en flores y fue fuertemente inducido por el metil jasmonato. Aquí clonamos el ADNc completo y el ADN genómico de GbWRKY2. El ADNc completo de GbWRKY2 tenía 1.713 pb y contenía un marco de lectura abierto de 1.014 pb que codificaba un polipéptido de 337 aminoácidos. El ADN genómico de GbWRKY2 tenía un intrón y dos exones. El GbWRKY2 deducido contenía un dominio WRKY y un motivo de dedo de zinc. GbWRKY2 se clasificó en el Grupo II de WRKYs. El análisis Southern blot reveló que GbWRKY2 era un gen de copia única en G. biloba. En la secuencia 5′-flanqueante de GbWRKY2, de 1.363 pb de longitud, se identificaron muchos elementos de acción cis relacionados con respuestas hormonales y al estrés, como W-box, ABRE-motif, MYBCOREs y PYRIMIDINE-boxes, lo que revela el mecanismo molecular de la expresión regulada de GbWRKY2 por tratamientos hormonales y de estrés. Otras caracterizaciones funcionales en hojas de tabaco transformadas transitoriamente nos permitieron identificar la región que puede considerarse el promotor mínimo.

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