Resumen

Las sondas fluorescentes permiten detectar especies no fluorescentes mediante fluorescencia inducida por láser de alta sensibilidad. Las aminas orgánicas son predominantemente no fluorescentes y son de interés analítico en la ciencia agrícola y alimentaria, en aplicaciones biomédicas y en la detección de armas biológicas. El éster N-hidroxisuccinimidílico Alexa Fluor 488 (éster AF488 NHS) es una sonda fluorescente específica de aminas. Aquí demostramos el bajo límite de detección de aminas primarias de cadena larga (C9 a C18) y optimizamos la derivatización de aminas primarias de cadena larga con AF488. La reacción resultó igualmente eficaz en todos los disolventes estudiados (dimetilsulfóxido, etanol y N,N-dimetilformamida). Aunque se requiere una base orgánica (N,N-diisopropiletilamina) para lograr una reacción eficaz entre el éster AF488 NHS y las aminas orgánicas con cadenas hidrofóbicas más largas, las concentraciones elevadas (>5 mM) dan lugar a un aumento de los niveles de etilamina y propilamina en el blanco. Los tiempos de incubación óptimos resultaron ser >12 horas a temperatura ambiente. Presentamos una separación inicial por electroforesis capilar para el análisis utilizando un simple tampón de cromatografía electrocinética micelar (MEKC) consistente en 12 mM de dodecilsulfato sódico (SDS) y 5 mM de carbonato, pH 10. Los límites de detección utilizando el tampón MEKC se han optimizado. Los límites de detección utilizando las condiciones de etiquetado optimizadas y estas condiciones de separación fueron de 5-17 nM. El método presentado aquí representa una nueva adición al arsenal de sondas fluorescentes disponibles para el análisis altamente sensible de pequeñas moléculas orgánicas.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Análisis químico Espectroscopia Farmacocinética
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Chemical test Spectroscopy Pharmacokinetics
• Palabras claves:detección, af488 nhs, aminas primarias, separación inicial por electroforesis capilar, cromatografía electrocinética micelar simple, tiempos de incubación óptimos, cadenas hidrofóbicas más largas, mm de dodecilsulfato de sodio, moléculas orgánicas pequeñas, sonda fluorescente específica.
• Keywords:detection, af488 nhs, primary amines, initial capillary electrophoresis separation, simple micellar electrokinetic chromatography, optimal incubation times, longer hydrophobic chains, mm sodium dodecylsulfate, small organic molecules, specific fluorescent probe