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Quantitative Clinical Diagnostic Analysis of Acetone in Human Blood by HPLC: A Metabolomic Search for Acetone as IndicatorAnálisis de Diagnóstico Clínico Cuantitativo de Acetona en Sangre Humana por HPLC: Una búsqueda metabolómica de la acetona como indicador

Resumen

Utilizando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y 2,4-dinitrofenilhidrazina (2,4-DNPH) como reactivo derivatizante, se desarrolló un método analítico para la determinación cuantitativa de acetona en sangre humana. La determinación se llevó a cabo a 365 nm utilizando un detector de matriz de diodos (DAD) ultravioleta-visible (UV-Vis). Para la acetona como su derivado 2,4-dinitrofenilhidrazona, se logró una buena separación con una columna ThermoAcclaim C18 (15 cm × 4,6 mm × 3 μm) a un tiempo de retención (tR) de 12,10 min y un caudal de 1 mL min-1 utilizando un gradiente de elución (metanol/acetonitrilo) agua. La metodología es sencilla, rápida, sensible y de bajo coste, exhibe buena reproducibilidad y permite el análisis de acetona en fluidos biológicos. Se obtuvo una curva de calibración para la acetona utilizando sus soluciones estándar en acetonitrilo. El análisis cuantitativo de acetona en sangre humana se llevó a cabo con éxito utilizando esta gráfica de calibración. El método aplicado fue validado en parámetros de linealidad, límite de detección y cuantificación, exactitud y precisión. También presentamos la acetona como una herramienta útil para la investigación metabolómica basada en HPLC del metabolismo endógeno y el análisis de diagnóstico clínico cuantitativo.

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