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Artículo

Application of Monoclonal Antibodies against Bioactive Natural Products: Eastern Blotting and Preparation of Knockout ExtractAplicación de anticuerpos monoclonales contra productos naturales bioactivos: Blotting oriental y preparación del extracto de Knockout

Resumen

Para la confirmación del número de haptenos en el antígeno sintetizado se utilizó la desorción/ionización láser asistida por matriz (MALDI) para la espectrometría de masas. Como aplicación de los MAb, se han preparado los MAbs contra los ginsenósidos y la glicirricina, lo que ha dado lugar al desarrollo de dos nuevas técnicas que hemos denominado método de blotting oriental y preparación del extracto de noqueo. En la técnica de blotting oriental, los glicósidos como los ginsenósidos y la glicirricina separados por TLC en gel de sílice se secaron en una membrana de PVDF que se trató con una solución de NaIO4 seguida de BSA, lo que dio lugar a un conjugado glicósido-BSA en una membrana de PVDF. Los puntos teñidos se tiñeron con MAb. La doble tinción del blotting oriental para ginsenósidos utilizando MAbs antiginsenósidos Rb1 y Rg1 promovió la identificación completa de los ginsenósidos en la especie Panax. La concentración de inmunoafinidad de la glicirricina se determinó mediante una columna de inmunoafinidad conjugada con MAb antiglicirricina que dio como resultado el extracto de glicirricina-knockout, que se determinó por el efecto sinérgico con la glicirricina sobre la producción de NO utilizando la línea celular.

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