Resumen

En la regeneración de NADH, la formato deshidrogenasa (FDH) es una enzima altamente significativa en la industria farmacéutica. En este trabajo, la mutagénesis por saturación de sitios (SSM), que es una combinación de diseño racional y enfoques de evolución dirigida, se aplica para alterar la especificidad de coenzima de la FDH dependiente de NAD de NAD a NADP y aumentar su termoestabilidad. Con este objetivo, se construyen dos bibliotecas separadas para el cribado de un cambio en la especificidad de coenzima y un aumento en la termoestabilidad. Para alterar la especificidad de coenzima, en el dominio de unión de coenzima, las posiciones 195, 196 y 197 son sometidas a dos rondas de SSM y cribado, lo que permitió la identificación de dos dobles mutantes D195S/Q197T y D195S/Y196L. Estos mutantes aumentan la eficiencia catalítica general de NAD en un valor de -veces y -ve

• Materias:Enfermeras Método espectrofotométrico Estructuras biomecánicas Timpanoplastia Efecto antiplasmodial
• Subjects:Nurses Spectrophotometric method Biomechanical structures Tympanoplasty Antiplasmodial effect
• Palabras claves:Nad; Formiato deshidrogenasa; Ssm; Especificidad coenzimática; Termoestabilidad; Mutantes
• Keywords:Nad; Formate dehydrogenase; Ssm; Coenzyme specificity; Thermostability; Mutants