Resumen

La ingeniería de circuitos sintéticos en células se basa en el uso de partes biológicas bien caracterizadas que realizarían las funciones previstas en la situación considerada, y se han realizado muchos esfuerzos para establecer estándares biológicos que puedan definir las características básicas de estas partes. Sin embargo, dado que la mayoría de los proyectos de biología sintética suelen requerir un determinado chasis celular y un conjunto de condiciones de crecimiento, la definición de estándares sobre el terreno no es una tarea sencilla, ya que las mediciones de la expresión génica podrían verse gravemente afectadas por el fondo genético y las condiciones de cultivo. En este estudio, abordamos la parametrización de promotores en bacterias con diferentes antecedentes genéticos y condiciones de crecimiento. Descubrimos que un pequeño conjunto de promotores constitutivos de diferentes intensidades que controlan un reportero GFP de vida corta colocado en un plásmido de bajo número de copias produce resultados notablemente reproducibles que permiten la calibración de la actividad del promotor en diferentes contextos genéticos y condiciones fisiológicas, proporcionando así una forma sencilla de establecer estándares de actividad del promotor en bacterias. Basándonos en estos resultados, propusimos la utilización de promotores constitutivos sintéticos como herramientas de calibración para la estandarización de partes biológicas, de forma similar al uso de escaleras de ADN y proteínas en biología molecular como referencias para la comparación con muestras de interés.

• Materias:Ácido ribonucleico (ARN) Biosíntesis Biogénesis Genética vegetal Genómica
• Subjects:Ribonucleic acid (RNA) Biosynthesis Biogenesis Plant genetics Genomics
• Palabras claves:diferentes antecedentes genéticos, partes biológicas, condiciones de crecimiento, actividad promotora, la mayoría de los proyectos de biología sintética, plásmido con número de copias, mediciones de la expresión génica, chasis celulares particulares, promotores constitutivos sintéticos, bacterias
• Keywords:different genetic backgrounds, biological parts, growth conditions, promoter activity, most synthetic biology projects, copy number plasmid, gene expression measurements, particular cellular chassis, synthetic constitutive promoters, bacteria