Resumen

Una proteína antifúngica aislada de Escherichia coli BL21 (PPEBL21) y predicha como alcohol deshidrogenasa (ADH) fue sometida a caracterización biológica. Efectivamente, la PPEBL21 demostró una actividad ADH específica del propionaldehído. La Km y la Vmax de PPEBL21 resultaron ser 644,8 μM y 1,2 U/mg, respectivamente. El ensayo de actividad en gel también demostró que PPEBL21 era una ADH propionaldehído-específica. Se observó que el pI de PPEBL21 era de 7,8. Se observó que PPEBL21 era estable hasta una temperatura de 40∘C con una actividad óptima a pH 7,5. La disminución del pH redujo la actividad de PPEBL21. Estos resultados sugieren que PPEBL21, con actividad alcohol deshidrogenasa y estabilidad a temperaturas significativamente altas, podría ser una importante molécula antifúngica líder. Se realizaron experimentos para identificar la posible diana de PPEBL21 en el patógeno A. fumigatus. Los resultados revelaron que PPEBL21 inhibía completamente la expresión de una proteína de 16 kDa en A. fumigatus. La proteína de 16 kDa de A. fumigatus a la que se dirige PPEBL21 se identificó como una proteína hipotética mediante huella dactilar de masa peptídica. Por lo tanto, la hipótesis es que el factor de 16 kDa es esencialmente necesario para la supervivencia de A. fumigatus y su síntesis alterada debido al tratamiento con PPEBL21 puede conducir a la muerte del patógeno.

• Materias:Microbiología Bacteriología Genética microbiana Virología Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
• Subjects:Microbiology Bacteriology Microbial genetics Virology Polymerase chain reaction
• Palabras claves:PPEBL21, A. fumigatus, proteína kDa, importante molécula antifúngica líder, Escherichia coli BL21, actividad alcohol deshidrogenasa, ensayo de actividad en gel, patógeno A. fumigatus, huella dactilar de masa peptídica, actividad ADH específica.
• Keywords:PPEBL21, A. fumigatus, kDa protein, important lead antifungal molecule, Escherichia coli BL21, alcohol dehydrogenase activity, gel activity assay, pathogen A. fumigatus, peptide mass fingerprinting, specific ADH activity