Resumen

Las nanopartículas de poli(D,L-lactida-co-glicolida-) (PLGA-)quitosano se están convirtiendo en una opción cada vez más común para la entrega de ácidos nucleicos a las células para diversas técnicas de manipulación genética. Estas partículas son biocompatibles, de tamaño y propiedades superficiales sintonizables, y poseen una carga positiva general que favorece la formación de complejos con ácidos nucleicos cargados negativamente. Este estudio examina las propiedades del complejo nanopartículas de PLGA-chitosán/ADN plásmido tras su formación. En concreto, el estudio pretende determinar la proporción óptima de ADN plasmídico:nanopartículas con fines de administración de ácidos nucleicos y dilucidar la ubicación del ADNp dentro de estos complejos. Dicha caracterización será necesaria para la adopción de estas formulaciones en un entorno clínico. La capacidad de las nanopartículas de PLGA-chitosán para formar complejos con ADNp se evaluó utilizando el intercalante fluorescente OliGreen para marcar ADN plasmídico libre. Mediante la monitorización de la fluorescencia en diferentes proporciones de plásmido: nanopartícula, se determinó que la proporción ideal de plásmido:nanopartícula para la complejación completa del plásmido era de 1:50. La Espectroscopia Raman de superficie mejorada y los estudios de digestión en gel sugirieron que, incluso en estas proporciones óptimas de complejación, una parte del ADN plasmídico se encontraba en la superficie externa del complejo. Este conocimiento facilitará futuras investigaciones sobre la funcionalidad del sistema in vitro e in vivo.

• Materias:Biotecnología Análisis electroquímico Nanopartículas Nanocompuestos Nanocables
• Subjects:Biotechnology Electrochemical analysis Nanoparticles Nanocomposites Nanowires
• Palabras claves:ácidos nucleicos, adn plasmídico, suministro de ácidos nucleicos, diversas técnicas de manipulación genética, espectroscopia raman mejorada, adn plasmídico libre, estudios de digestión en gel, relaciones óptimas de complejación, superficie externa del complejo, carga positiva global
• Keywords:nucleic acids, plasmid dna, nucleic acid delivery purposes, various genetic manipulation techniques, enhanced raman spectroscopy, free plasmid dna, gel digest studies, optimal complexation ratios, outer complex surface, overall positive charge