Resumen

La oxidación de la guanina (G) a 7,8-dihidro-8-oxoguanina (GO) forma una de las principales lesiones del ADN generadas por las especies reactivas del oxígeno (ROS). La GO puede ser corregida por las glucosilasas del ADN (Ogg), enzimas que participan en la reparación por escisión de bases (BER). La GO no reparada induce un emparejamiento erróneo de bases con adenina (A); como resultado, el emparejamiento erróneo causa una mutación puntual, de G emparejada con citosina (C) a timina (T) emparejada con adenina (A), durante la replicación del ADN. Aquí, informamos de la caracterización de un Ogg putativo de la arquea termoacidófila Thermoplasma volcanium. La secuencia de 204 aminoácidos de la Ogg putativa (TVG_RS00315) comparte una significativa homología de secuencia con las glicosilasas de ADN de Methanocaldococcus jannaschii (MjaOgg) y Sulfolobus solfataricus (SsoOgg). El gen de la proteína TVG_RS00315 recombinante, marcado con seis histidinas, se expresó en Escherichia coli y se purificó. La proteína Ogg es termoestable, con una actividad óptima cerca de un pH de 7,5 y una temperatura de 60°C. La enzima muestra actividades de ADN glicosilasa y apurínica/aprimidínica (AP) liasa en el desajuste GO/N (donde N es A, T, G o C); sin embargo, no puede eliminar U de U/G o T de T/G, como sí puede hacerlo la glicosilasa de desajuste (MIG). Estos resultados indican que la TVG_RS00315 que codifica TvoOgg es un miembro de la familia Ogg2 de T. volcanium.

• Materias:Enzimas Microbiología Aguas residuales Arqueas metanogénico
• Subjects:Enzymes Microbiology Sewage Archeas methanogenic
• Palabras claves:ogg putativo, especies reactivas de oxígeno, go, arquea termoacidófila thermoplasma, lesiones mayores de adn, reparación de escisión de bases, arquea thermoplasma volcanium, glicosilasas de adn go, homología de secuencia significativa, glicosilasas de methanocaldococcus
• Keywords:putative ogg, reactive oxygen species, go, thermoacidophilic archaeon thermoplasma, major dna lesions, base excision repair, archaeon thermoplasma volcanium, go dna glycosylases, significant sequence homology, glycosylases of methanocaldococcus