Resumen

Se ha propuesto que la persulfuro reductasa dependiente de NADH (Npsr) facilita la respiración disimilatoria del azufre mediante la reducción de sustratos que contienen persulfuro o azufre a H2S. La presencia de este gen en el Archaeoglobus fulgidus DSM 4304, reductor de sulfato y tiosulfato, y en otros Archaeoglobales hipertermófilos, parece anómala, ya que A. fulgidus es incapaz de respirar S0 y crecer en presencia de azufre elemental. Para evaluar el papel de Npsr en el metabolismo de azufre de A. fulgidus DSM 4304, el Npsr de A. fulgidus se caracterizó. AfNpsr es específica para el persulfuro y el polisulfuro como sustratos en la media reacción oxidativa, exhibiendo kcat/Km del orden de 104 M-1 s-1, que es similar a los parámetros cinéticos observados para las reductasas de persulfuro de CoA hipertermófilas. A diferencia de la Npsr bacteriana, la AfNpsr presenta una baja actividad disulfuro reductasa con DTNB; sin embargo, al igual que las enzimas bacterianas, no muestra una actividad detectable con CoA-disulfuro, glutatión oxidado o cistina. La estructura de rayos X de 3,1 Å de AfNpsr revela el acceso a la CoA catalítica fuertemente unida, y el sitio activo Cys 42 está restringido por un bucle flexible (residuos 60-66) que no se ve en los homólogos bacterianos de Shewanella loihica PV-4 y Bacillus anthracis. A diferencia de las enzimas bacterianas, AfNpsr presenta actividad NADH oxidasa y tampoco muestra actividad detectable con NADPH. Los modelos sugieren que las repulsiones estéricas y electrostáticas del NADPH 2′-fosfato explican la fuerte preferencia por el NADH. La presencia de Npsr en el A. fulgidus no reductor de azufre sugiere que la enzima puede ofrecer alguna protección contra el S0 o servir en otro papel metabólico que aún no se ha identificado.

• Materias:Carbono Elementos químicos Cinética química Metano
• Subjects:Carbon Chemical elements Chemical kinetics Methane
• Palabras claves:enzima bacteriana, actividades detectables, archaeoglobus fulgidus dsm, persulfuro reductasa dependiente, respiración disimilatoria del azufre, estructura de la afnpsr, papel de la npsr, fulgidus, presencia de la npsr, coa catalítica ligada
• Keywords:bacterial enzyme, detectable activities, archaeoglobus fulgidus dsm, dependent persulfide reductase, dissimilatory sulfur respiration, structure of afnpsr, role of npsr, fulgidus, presence of npsr, bound catalytic coa