Resumen

En una reacción dependiente de ATP, la helicasa RecG de Escherichia coli desenrolla uniones de ADN in vitro. Presentamos pruebas de un cambio conformacional único de la proteína en la helicasa RecG de una α-hélice a una β-hebra tras una unión de ATP en condiciones diluidas mediante espectroscopia de dicroísmo circular (CD). En cambio, en condiciones de aglomeración molecular, la conformación α-hélice se mantuvo estable incluso tras la unión de ATP. Se observó que estos distintos comportamientos conformacionales eran independientes del Na y el Mg2 . Curiosamente, las mediciones de CD demostraron que los espectros de un dúplex deshilachado disminuían con el aumento de la concentración de RecG tanto en condiciones de dilución como de aglomeración molecular en presencia de ATP, lo que sugiere que RecG desenrollaba el dúplex deshilachado. Nuestros hallazgos plantean la posibilidad de que las formas α-hélice y β-cadena de RecG sean una estructura preactiva y activa con la actividad helicasa, respectivamente.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:condiciones de aglomeración molecular, escherichia coli recg helicasa, comportamientos conformacionales distintos, atp, recg, dúplex, hélice, unión atp, medidas cd, uniones adn
• Keywords:molecular crowding conditions, escherichia coli recg helicase, distinct conformational behaviors, atp, recg, duplex, helix, atp binding, cd measurements, dna junctions