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Recombinant Cyclodextrinase from Thermococcus kodakarensis KOD1: Expression, Purification, and Enzymatic CharacterizationCiclodextrinasa recombinante de Thermococcus kodakarensis KOD1: Expresión, purificación y caracterización enzimática

Resumen

Se ha identificado y caracterizado un gen que codifica una ciclodextrinasa de Thermococcus kodakarensis KOD1 (CDase-Tk). El gen codifica una proteína de 656 residuos aminoácidos con una masa molecular de 76,4 kDa que alberga cuatro regiones conservadas que se encuentran en todos los miembros de la familia de las α-amilasas. Se purificó una forma recombinante de la enzima mediante cromatografía de intercambio iónico y se examinaron sus propiedades catalíticas. La enzima era activa en una amplia gama de condiciones de pH (pHs 4,0-10,0), con un pH óptimo de 7,5 y una temperatura óptima de 65°C. La enzima purificada prefirió hidrolizar β-ciclodextrina (CD) pero no α- o γ-CD, almidón soluble o pullulan. El producto final de la β-CD fue la glucosa. Los valores de Vmax y Km fueron 3,13 ± 0,47 U mg-1 y 2,94 ± 0,16 mg mL-1 para la β-CD. Se discuten las características únicas de la CDasa-Tk con una baja temperatura catalítica y la especificidad del sustrato, y también se propone la vía de utilización del almidón en un amplio rango de temperaturas.

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Información del documento

  • Titulo:Recombinant Cyclodextrinase from Thermococcus kodakarensis KOD1: Expression, Purification, and Enzymatic Characterization
  • Autor:Ying, Sun; Xiaomin, Lv; Zhengqun, Li; Jiaqiang, Wang; Baolei, Jia; Jinliang, Liu
  • Tipo:Artículo
  • Año:2015
  • Idioma:Inglés
  • Editor:Hindawi Publishing Corporation
  • Materias:Células Enzimas Minería Minas y minería metanogénico Ecología
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