Resumen

Antecedentes. Los ARN circulares (circARN) se consideran ARN endógenos competidores (ceARN) y desempeñan un papel clave en la progresión del cáncer de pulmón no microcítico (CPNM). Así pues, este estudio tenía como objetivo aclarar los mecanismos moleculares subyacentes de circHUWE1 en el CPNM. Métodos. Se utilizaron la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) y análisis western blot para examinar circHUWE1, microRNA-34a-5p (miR-34a-5p) y la proteína 8 inducida por el factor de necrosis tumoral alfa (TNFAIP8). La IC50 del cisplatino (DDP) en las células A549/DDP y H1299/DDP y la viabilidad celular se analizaron mediante el ensayo del kit de recuento celular 8 (CCK-8). Se realizó un ensayo de formación de colonias para evaluar la capacidad de formación de colonias. La apoptosis celular y la distribución del ciclo celular se determinaron mediante citometría de flujo. El número de células migradas e invadidas se examinó mediante el ensayo transwell. La asociación entre circHUWE1, miR-34a-5p y TNFAIP8 se analizó mediante un reportero de luciferasa dual y ensayos de inmunoprecipitación de ARN. Se aplicó un experimento de xenoinjerto para aclarar el papel funcional de circHUWE1 in vivo. La regulación a la baja de circHUWE1 inhibió la resistencia al DDP, la proliferación, la migración y la invasión, a la vez que indujo la apoptosis y la detención del ciclo celular de las células de CPNM resistentes al DDP, lo que fue revertido por el silenciamiento de miR-34a-5p. TNFAIP8 era un gen funcional de miR-34a-5p, y los efectos supresores de la sobreexpresión de miR-34a-5p en la progresión del CPNM resistente al DDP dependían de la supresión de TNFAIP8. La inhibición de circHUWE1 también retrasó el crecimiento tumoral de las células de CPNM resistentes al DDP. Conclusión. circHUWE1 funcionó como promotor en el CPNM resistente al DDP mediante la interacción con las redes miR-34a-5p-TNFAIP8, proporcionando una nueva perspectiva en el diagnóstico y tratamiento del CPNM resistente al DDP.

• Materias:Ácido ribonucleico (ARN) Biosíntesis Genoma Genética vegetal Proteómica
• Subjects:Ribonucleic acid (RNA) Biosynthesis genome Plant genetics Proteomics
• Palabras claves:DDP, circHUWE1, miR-34a-5p, células NSCLC resistentes, TNFAIP8, reacción en cadena de la polimerasa en el tiempo, factor de necrosis tumoral alfa, kit de recuento celular, ensayos de inmunoprecipitación de ARN, detención del ciclo celular.
• Keywords:DDP, circHUWE1, miR-34a-5p, resistant NSCLC cells, TNFAIP8, time polymerase chain reaction, tumor necrosis factor alpha, Cell Counting Kit, RNA immunoprecipitation assays, cell cycle arrest