Resumen

La degeneración del disco intervertebral (IDD) está ampliamente aceptada como causa del dolor lumbar y los trastornos musculoesqueléticos degenerativos relacionados. La pérdida de células del núcleo pulposo (NP) está estrechamente relacionada con la progresión de la IDD. Así pues, la investigación de agentes terapéuticos específicamente dirigidos contra la pérdida de células del NP depende de la comprensión de los mecanismos moleculares. En este estudio, se trataron células humanas del NP con peróxido de hidrógeno (H2O2). La viabilidad celular se evaluó utilizando el kit de recuento celular 8 (CCK-8). Se analizó la expresión de circARN repeticiones dipéptidas de ácido arginina-glutámico (hsa_circ_RERE) y miR-299-5p mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Se utilizó el análisis Western blot para evaluar los niveles de expresión proteica. Los niveles de autofagia en las células NP se detectaron mediante microscopio electrónico, inmunofluorescencia de la proteína LC3B y western blot. Los niveles de apoptosis de las células NP se detectaron mediante citometría de flujo y western blot. El ensayo reportero de doble luciferasa analizó la unión de miR-299-5p a circ_RERE y galectina-3. Nuestros resultados revelaron que el H2O2 inhibió significativamente la viabilidad de las células NP, promovió la apoptosis y la autofagia, y reguló al alza la expresión de galectina-3. miR-299-5p se redujo en las células NP inducidas por IDD y H2O2. La sobreexpresión de miR-299-5p promovió la viabilidad celular y atenuó la apoptosis y la autofagia bajo tratamiento con H2O2. Además, circ_RERE estaba regulada al alza en células IDD y NP inducidas por H2O2. Sin embargo, el knockdown de circ_RERE revirtió los efectos de la sobreexpresión de miR-299-5p sobre la viabilidad celular, la apoptosis y la autofagia en células NP. Proponemos que circ_RERE promueve la apoptosis inducida por H2O2 y la autofagia de las células NP a través del eje miR-299-5p/galectina-3 y puede proporcionar una nueva diana para el tratamiento clínico de la IDD.

• Materias:Insuficiencia cardíaca Plataforma de servicios Filtro de orden óptimo Características clínicas Osteoporosis
• Subjects:Heart failure Platform services Optimal order filtering Clinical features Osteoporosis
• Palabras claves:células NP, 5p, H2O2, IDD, apoptosis, autofagia, circ_RERE, miR-299, viabilidad celular, western blot
• Keywords:NP cells, 5p, H2O2, IDD, apoptosis, autophagy, circ_RERE, miR-299, cell viability, western blot