Resumen

Hemos desarrollado un ensayo basado en la citometría de flujo (FC), preciso y que indica la estabilidad, para medir directamente la antigenicidad de la proteína H4 en una formulación vacunal de H4-IC31, sin desorber la proteína H4 del adyuvante IC31. Este método implica la inmunotinción del complejo H4-IC31 con anticuerpos monoclonales (mAbs) anti-H4, seguida de un análisis de FC. El ensayo no sólo es capaz de medir de forma consistente los niveles de antigenicidad de H4 en H4-IC31 almacenado en condiciones normales a 2-8°C, sino que también es capaz de detectar cambios en la antigenicidad de H4 después de que H4-IC31 se someta a estrés térmico o a congelación-descongelación. Además, el método FC es capaz de caracterizar la morfología de las partículas mientras se mide la antigenicidad. La relevancia biológica de los cambios en la antigenicidad del H4 detectados por el ensayo de FC fue respaldada por un ensayo funcional in vitro basado en células utilizando PBMC humanas para medir la secreción de IFN-gamma (IFN-γ) tras la reestimulación con H4-IC31. Nuestros resultados demuestran que el ensayo de antigenicidad basado en la FC puede supervisar eficazmente las propiedades biológicas y fisicoquímicas del H4-IC31 y es un indicador de la estabilidad del producto vacunal adyuvado.

Biografía:

Liwei He cuenta con más de 25 años de experiencia en el mundo académico y la industria farmacéutica. Actualmente trabaja como científico en el Departamento de Investigación Analítica y Desarrollo de Sanofi Pasteur en Toronto.

Desarrollo Analítico de Sanofi Pasteur en Toronto. Ha contribuido a varios proyectos de vacunas y desarrollado métodos de ensayo analíticos para la caracterización de productos vacunales. También ha dirigido varios nuevos enfoques basados en multiplex para la caracterización y cuantificación de antígenos y ha contribuido a la validación de estos métodos de acuerdo con las directrices reglamentarias. Hasta la fecha, ha contribuido a varias publicaciones científicas y es coautor de algunas patentes relacionadas con tecnologías de vacunas.

• Materias:Antígenos y anticuerpos Agentes estabilizantes Citometría Proteínas
• Subjects:Antigens and antibodies Stabilizing agents Cytometry Proteins
• Palabras claves:Citometría de flujo, antigenicidad, vacuna adyuvada H4-IC31,Tuberculosis.
• Keywords:flow cytometry, antigenicity, adjuvanted vaccine H4-IC31,Tuberculosis.