Resumen

Se seleccionó la cepa de levadura (Saccharomyces cerevisiae) MTCC 3157 para la biosíntesis combinatoria del sesquiterpeno vegetal amorpha-4,11-dieno. Nuestro principal objetivo era sobreproducir amorfa 4-11-dieno, que es una molécula precursora clave de la artemisinina (fármaco antipalúdico) producida de forma natural en la planta Artemisia annua a través de la vía del mevalonato. El difosfato de farnesilo (FPP) es un metabolito intermedio común de una variedad de compuestos en la vía del mevalonato de la levadura y conduce a la producción de ergosteroles, dolicol y ubiquinona, entre otros. En nuestros estudios, el FPP se convirtió en amorfadieno (AD) expresando amorfadieno sintasa (ADS) heteróloga en levadura. En primer lugar, se sustituyó el promotor ERG9 (escualano sintasa) de la levadura por el promotor metionina reprimible (MET3) mediante el método de fusión bipartita de genes. Además, para superar la pérdida del intermediario FPP a través de vías competitivas en la levadura, se adoptó la tecnología de proteínas de fusión y se acopló la farnesildifosfato sintasa (FPPS) de la levadura con la amorfadieno sintasa (ADS) de origen vegetal (Artemisia annua L.) donde la producción de amorfadieno mejoró 2 veces (11,2 mg/L) y 4 veces (25,02 mg/L) en las cepas de levadura YCF-002 y YCF-005 en comparación con la cepa de control YCF-AD (5,5 mg/L), respectivamente.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Química farmacéutica Análisis espectroquímico
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Spectrochemical analysis
• Palabras claves:levadura, vía del mevalonato, método de fusión bipartita de genes, artemisia annua l., metabolito intermediario común, cepa de control ycf, tecnología de proteínas de fusión, amorfadieno sintasa heteróloga, molécula precursora clave, planta artemisia annua
• Keywords:yeast, mevalonate pathway, bipartite gene fusion method, artemisia annua l., common intermediate metabolite, control strain ycf, fusion protein technology, heterologous amorphadiene synthase, key precursor molecule, plant artemisia annua