Resumen

El aumento de dimetilarginina asimétrica (ADMA) en el plasma humano se ha asociado a una menor generación de óxido nítrico, lo que conduce a enfermedades ateroscleróticas. Por tanto, la ADMA puede ser un biomarcador importante de las enfermedades cardiovasculares. En el presente estudio, se compararon tres técnicas de preparación de muestras en relación con la cuantificación de L-arginina y ADMA en plasma humano: (A) precipitación de proteínas (PP) basada en ácido tricloroacético acuoso (TCA), (B) PP utilizando una mezcla de amoníaco y acetonitrilo, y (C) extracción en fase sólida (SPE). Las muestras se analizaron mediante cromatografía líquida de alto rendimiento con detección de fluorescencia (HPLC-FLD). El rendimiento analítico de (A) fue comparable al de (C), demostrando recuperaciones de >90%, coeficientes de variación (CV, %) de <8, y una resolución (Rs) entre ADMA y dimetilarginina simétrica (SDMA) de 1,2. (B) se descartó debido a recuperaciones inferiores al 75%. (A) se validó con buenos resultados en cuanto a linealidad (>0,994), precisión (<5%) y sensibilidad (límite inferior de cuantificación [LLOQ]) de 0,14 µM y 12 nM para L-arginina y ADMA, respectivamente. Debido a la simplicidad y velocidad del procedimiento (A), este enfoque puede servir como preparación preferida de muestras de plasma humano antes de HPLC-FLD para proporcionar información importante con respecto a concentraciones elevadas de ADMA.

• Materias:Análisis cromatográfico Química farmacéutica Estructura molecular Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Molecular structure Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:adma, plasma humano, ácido tricloroacético acuoso, concentraciones elevadas de adma, muestras de plasma humano, preparación preferente de muestras, técnicas de preparación de muestras, fld, hplc, arginina
• Keywords:adma, human plasma, aqueous trichloroacetic acid, elevated adma concentrations, human plasma samples, preferred sample preparation, sample preparation techniques, fld, hplc, arginine