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A Sequence-Dependent DNA Condensation Induced by Prion ProteinCondensación del ADN dependiente de la secuencia inducida por la proteína priónica

Resumen

Diferentes estudios indicaron que la proteína priónica induce la hibridación de cadenas complementarias de ADN. Los estudios en cultivos celulares demostraron que la isoforma scrapie de la proteína priónica permanecía unida al cromosoma. En el presente trabajo, utilizamos un colorante de oxazol, YOYO, como reportero para la caracterización cuantitativa de la condensación del ADN por la proteína priónica. Observamos que la proteína priónica induce un mayor apagamiento de la fluorescencia de YOYO intercalada en el ADN que contiene sólo bases GC en comparación con el ADN que contiene cuatro bases, mientras que el efecto del colorante unido al ADN que contiene sólo bases AT es marginal. Las poliaminas biológicas condensadoras del ADN son menos eficaces que la proteína priónica en el apagamiento de la fluorescencia de YOYO unida al ADN. La proteína priónica induce un apagamiento marginal de la fluorescencia del colorante unido a oligonucleótidos, que son resistentes a la condensación. Los estudios ultraestructurales con microscopio electrónico también validan los datos biofísicos. Las bases GC del ADN diana son probablemente responsables del aumento de la condensación en presencia de la proteína priónica. Hasta donde sabemos, este es el primer informe de una proteína celular humana que induce una condensación del ADN dependiente de la secuencia. El aumento de la condensación del ADN rico en GC por la proteína priónica puede sugerir una función biológica de la proteína priónica y un papel en su patogénesis.

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