Resumen

La tecnología de visualización de fagos es, sin duda, una potente herramienta para la selección por afinidad de péptidos específicos de dianas. Las bibliotecas de fagos prefabricadas disponibles en el mercado nos permiten realizar el cribado de la forma más sencilla. Por otro lado, la construcción de una biblioteca de fagos personalizada parece inaccesible, ya que en las instrucciones faltan varios consejos prácticos. Este artículo se centra en lo que deben tener en cuenta los principiantes que utilicen kits de clonación disponibles en el mercado (Ph.D. con vector tipo 3 y sistemas T7Select para fagos M13 y T7, respectivamente). En el sistema M13, debe evitarse Pro o un aminoácido básico (especialmente, Arg) en el N-terminal del péptido fusionado a gp3. En ambos sistemas, los péptidos que contengan un número impar de Cys deben diseñarse con precaución. Asimismo, se recomienda encarecidamente secuenciar el ADN de una biblioteca construida antes de la biopanificación para detectar sesgos inesperados.

• Materias:Genética molecular Ácido ribonucleico (ARN) Genómica Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos
• Subjects:Molecular genetics Ribonucleic acid (RNA) Genomics Polymerase chain reaction Nucleic acids
• Palabras claves:bibliotecas de fagos prefabricadas disponibles, tecnología de visualización de fagos, kits de clonación disponibles, aminoácido básico, biblioteca de fagos personalizada, varios consejos prácticos, secuenciación de adn, sistema m13, fago t7, sistemas t7select
• Keywords:available premade phage libraries, phage display technology, available cloning kits, basic amino acid, custom phage library, several practical tips, dna sequencing, m13 system, t7 phage, t7select systems