Resumen

Haloarchaeon Natrinema sp. J7, la primera arquea de la que se tiene constancia que alberga virus templados tanto plasmídicos como cromosómicos, es un modelo útil para investigar las interacciones arqueas virus-huésped y virus-virus. Sin embargo, la falta de herramientas genéticas ha limitado estos estudios. Sobre la base de las secuencias de replicación automática del cromosoma J7 y del marcador pyrF, construimos siete vectores, seis de los cuales se confirmó que poseían capacidad de replicación en un derivado de J7 con deleción de pyrF (J7-F). Entre estos vectores, pFJ1, pFJ4 y pFJ6 podían transformarse en la cepa huésped con una eficiencia relativamente alta (aproximadamente 103 unidades formadoras de colonias/μg de ADN) y estaban presentes en aproximadamente una copia por cromosoma. Estos tres vectores pudieron mantenerse de forma estable en J7-F sin selección y se utilizaron para la expresión de proteínas heterólogas. Sólo pFJ6 estaba presente en las células transformadas en un estado exclusivamente episomal y no integrado (una copia por cromosoma). En cambio, parte del ADN de pFJ1 y pFJ4 estaba probablemente integrado en el cromosoma J7-F. Además, se comprobó que pFJ6 era compatible con pYCJ en las células J7, lo que sugiere que estos dos vectores podrían utilizarse para nuevos estudios de las interacciones virus-virus y virus-huésped.

• Materias:Dióxido de carbono Genes Metabolismo (Bioquimica) Arqueas metanogénico
• Subjects:Carbon dioxide Genes Metabolism (Biochemistry) Archeas methanogenic
• Palabras claves:vector, cromosoma, estudio de virus, expresión de proteínas heterólogas, virus, derivados de j7, virus templado basado, pfj6, primer arquetipo reportado, j7-f
• Keywords:vector, chromosome, study of virus, heterologous protein expression, virus, derivatives of j7, based temperate virus, pfj6, first reported archaeon, j7-f