Resumen

Los genes marcadores seleccionables son genes de resistencia necesarios para la eliminación de genes, la complementación de genes y la sobreexpresión de genes en hongos filamentosos. Además, cuanto más sensibles sean los hongos filamentosos a los antibióticos, más útil será cribar los transformantes objetivo. Con el fin de obtener el antibiótico (o herbicida) que pueda inhibir eficazmente el crecimiento de Cordyceps militaris y verificar la función del gen de resistencia correspondiente en C. militaris, se comparó la sensibilidad de C. militaris a la higromicina y al glufosinato de amonio para determinar el gen de resistencia más adecuado para el cribado de los transformantes de C. militaris. El vector binario del gen marcador seleccionable se construyó combinando el método de PCR de doble unión (DJ-PCR) y el método de recombinación homóloga, y la función del gen marcador seleccionable en C. militaris se verificó mediante el método de transformación mediada por Agrobacterium tumefaciens. Los resultados mostraron que C. militaris era más sensible al glufosinato de amonio que a la higromicina. El crecimiento de C. militaris podía inhibirse completamente con 250 μg/mL de glufosinato de amonio. El casete de expresión del gen de resistencia al glufosinato de amonio (gen bar) se construyó con éxito mediante DJ-PCR. El vector binario pCAMBIA0390-Bar se construyó con éxito mediante recombinación homóloga. El gen bar del vector pCAMBIA0390-Bar se integró con éxito en el genoma de C. militaris y pudo expresarse en gran medida en los transformantes de C. militaris. Este estudio promoverá la identificación de la función génica de C. militaris y revelará las vías biosintéticas de los componentes bioactivos en C. militaris.

• Materias:Biotecnología de alimentos Composición de los alimentos Microbiología de alimentos Tecnología de alimentos Análisis de los Alimentos
• Subjects:Food biotechnology Food composition Food microbiology Food technology Food Analysis
• Palabras claves:c. militaris, gen marcador seleccionable, glufosinato de amonio, gen bar, hongos filamentosos, gen de resistencia, función del gen c. militaris, gen de resistencia al glufosinato de amonio, vector binario pcambia0390, método de recombinación homóloga
• Keywords:c. militaris, selectable marker gene, glufosinate ammonium, bar gene, filamentous fungi, resistance gene, c. militaris gene function, glufosinate ammonium resistance gene, binary vector pcambia0390, homologous recombination method