Resumen

Se ha desarrollado un método sencillo y rápido de cromatografía líquida y espectrometría de masas en tándem para la determinación de BH4, DA, 5-HT, NE, EP, Glu y GABA en cerebro de ratón utilizando ácido épsilon-acetamidocaproico y neurotransmisores marcados isotópicamente como patrones internos. Las proteínas de las muestras se precipitaron añadiendo acetonitrilo y, a continuación, los sobrenadantes se separaron mediante una columna Sepax Polar-Imidazole (2,1 mm × 100 mm, i.d., 3 μm) añadiendo una mezcla de formiato de amonio 10 mM en acetonitrilo/agua (75 : 25, v/v, 300 μl/min) para BH4 y DA. Para ensayar 5-HT, NE, EP, Glu y GABA; se utilizó una columna Luna 3 μ C18 (3,0 mm × 150 mm, i.d., 3 μm) añadiendo una mezcla de ácido 1órmico en acetonitrilo/agua (20 : 80, v/v, 350 μl/min). El tiempo total de ejecución cromatográfica fue de 5,5 min. El método se validó para el análisis de muestras. La curva de calibración fue lineal entre 10 y 2000 ng/g para BH4 r 2 = 0,995 , 10 y 5000 ng/g para DA r 2 = 0,997 , 20 y 10000 ng/g para 5-HT r 2 = 0,994 , NE r 2 = 0,993 , y EP r 2 = 0,993 , y 0,2 y 200 μg/g para Glu r 2 = 0,996 y GABA r 2 = 0,999 en los tejidos cerebrales de ratón. Como se ha indicado anteriormente, se obtuvieron resultados LC-MS/MS y se estableció que son una herramienta útil para el análisis cuantitativo de BH4, DA, 5-HT, NE, EP, Glu y GABA en el cerebro experimental de roedores.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Electroquímica Farmacocinética Análisis espectroquímico
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Electrochemistry Pharmacokinetics Spectrochemical analysis
• Palabras claves:bh4, gaba, glu, min, método rápido de espectrometría de masas en tándem por cromatografía líquida, tiempo total de ejecución cromatográfica, cerebro experimental de roedor, mm de formiato de amonio, tejidos cerebrales de ratón, acetonitrilo.
• Keywords:bh4, gaba, glu, min, rapid liquid chromatography tandem mass spectrometry method, total chromatographic run time, experimental rodent brain, mm ammonium formate, mouse brain tissues, acetonitrile