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Simple Quantification of Pentosidine in Human Urine and Plasma by High-Performance Liquid ChromatographyCuantificación sencilla de pentosidina en orina y plasma humanos mediante cromatografía líquida de alto rendimiento

Resumen

La pentosidina es un producto final de la glicación avanzada (AGE) y un compuesto de enlace cruzado fluorescente. Se desarrolló un método sencillo de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) para la detección y cuantificación de pentosidina en orina y plasma humanos. La fase móvil utilizó un sistema de gradiente para mejorar la separación de la pentosidina de los picos endógenos, y los cromatogramas se monitorizaron mediante un detector fluorescente ajustado a longitudes de onda de excitación y emisión de 328 y 378 nm, respectivamente. El tiempo de retención de la pentosidina fue de 24,3 minutos y los límites inferiores de cuantificación (LLOQ) en orina y plasma humanos fueron de 1 nM. Las precisiones intradiarias del ensayo (coeficientes de variación) fueron generalmente bajas y se encontraron en el rango de 5,19-7,49 y 4,96-8,78 en orina y plasma humanos, respectivamente. Los valores correspondientes a las precisiones de los ensayos interdiarios fueron de 9,45 y 4,27%. Las precisiones (errores relativos) oscilaron entre el 87,9% y el 115%. La pentosidina fue estable en un rango de soluciones de pH, orina humana y plasma. En resumen, este método de HPLC puede aplicarse en la futura evaluación preclínica y clínica de la pentosidina en los pacientes diabéticos.

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