Resumen

Las células madre mesenquimales (MSC) tienen un gran potencial de aplicación en procedimientos de terapia celular e ingeniería tisular debido a su plasticidad y capacidad para diferenciarse en distintos tipos celulares. Dado el uso generalizado de las CMM, es necesario comprender mejor algunas propiedades relacionadas con la diferenciación osteogénica, en particular las vinculadas a los biomateriales utilizados en ingeniería tisular. El objetivo de este estudio fue desarrollar un método de análisis mediante espectroscopia FT-Raman para la identificación y cuantificación de componentes bioquímicos presentes en medios de cultivo condicionados derivados de MSCs con o sin inducción de diferenciación osteogénica. Todos los experimentos se realizaron entre los pasajes 3 y 5. Para este análisis, las MSC se cultivaron en andamiajes compuestos por polímeros biorreabsorbibles de poli(hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) y poli(ε-caprolactona) (PCL). Se inocularon CMM (GIBCO®) en los polímeros puros y en la mezcla 75:25 PHBV/PCL (muestras densas y porosas). La propia placa se utilizó como control. Las células se mantuvieron en DMEM (con baja glucosa) conteniendo GlutaMAX® y 10% FBS a 37oC con 5% CO2 durante 21 días. Los medios de cultivo condicionados se recogieron y analizaron para sondear grupos funcionales, así como posibles variaciones moleculares asociadas a la diferenciación celular y el metabolismo. El método permitió identificar grupos funcionales de moléculas específicas en el medio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicéridos, polipéptidos de subunidades beta, regiones amidas y enlaces de hidrógeno de proteínas, además de la expresión del ADN. En el presente estudio, la espectroscopia FT-Raman mostró una resolución limitada, ya que diferentes moléculas pueden expresar vibraciones de estiramiento similares o incluso las mismas, hecho que dificulta el análisis. No hubo variaciones en las lecturas entre las muestras estudiadas. En conclusión, la espectroscopia FT-Raman no cumplió las expectativas en las condiciones estudiadas.

• Materias:Acetamida
• Subjects:Acetamida
• Palabras claves:Biomateriales; Ingeniería de tejidos; Diferenciación celular; Espectroscopía vibracional
• Keywords:Biomaterials; Tissue engineering; Cell differentiation; Vibrational spectroscopy