Resumen

El ácido fólico (AF) es una vitamina importante para el crecimiento humano, especialmente para las mujeres embarazadas. La deficiencia de AF se asocia a anemia megaloblástica, defectos del tubo neural, enfermedades cardiovasculares, irritabilidad, diarrea y trastornos psiquiátricos. Normalmente, las moléculas de AF se unen a la proteína de unión al folato (FBP) en el suero en forma de complejo. Antes de cuantificar la concentración de AF, debe realizarse un procedimiento de liberación. La condición alcalina y la tris(2-carboxietil)fosfina (TCEP) se utilizan para liberar el AF ligado al estado de liberación. En este trabajo, se estableció un inmunoensayo de quimioluminiscencia (CLIA) para el AF del suero humano mediante un modelo de competencia. La estreptavidina (SA) se marcó en perlas magnéticas mediante un método de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida/N-hidroxisuccinimida (EDAC/NHS). Las moléculas de biotina activadas se marcaron con moléculas de FBP purificadas a partir de leche. El AF se marcó a la peroxidasa de rábano picante (HRP) mediante EDAC para activar las moléculas de AF. Las muestras pretratadas o los estándares se añadieron al tubo de reacción con biotina-FBP y FA-peroxidasa de rábano picante (HRP), el FA de la muestra compite con la FA-HRP por unirse a la biotina-FBP, la señal es inversamente proporcional a la concentración de FA. El método establecido muestra buena termoestabilidad y rendimiento. El límite de detección (LOD) es de 0,44 ng/mL. El coeficiente de variación (CV) intraensayo es del 3,6%-7,1%, el CV interensayo es del 4,2%-7,5%, y la tasa de recuperación es del 92,1%-103,5%. La reactividad cruzada (RC) fue notablemente baja con la aminopterina, el ácido folínico y el metotrexato. El método muestra una buena correlación con el producto FA CLIA de Beckman Coulter; la ecuación es y = 0,9618x-0,1434 mientras que el valor R2 es 0,9224. El método establecido es sensible, rápido y preciso, y puede satisfacer plenamente los requisitos clínicos.

• Materias:Análisis cromatográfico Estructura molecular Análisis químico Farmacocinética Voltamperometría
• Subjects:Chromatographic analysis Molecular structure Chemical test Pharmacokinetics Voltammetry
• Palabras claves:método, fbp, hrp, concentración de fa, moléculas de fa, peroxidasa de rábano picante, moléculas de biotina activadas, producto clia de fa, fa en suero humano, defectos del tubo neural
• Keywords:method, fbp, hrp, fa concentration, fa molecules, horseradish peroxidase, activated biotin molecules, fa clia product, human serum fa, neural tube defects