Resumen

Se ha desarrollado la PCR multiplex en tiempo real con sondas TaqMan® para la detección simultánea de los patógenos de la soja Pseudomonas savastanoi pv. glycinea y Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens. La especificidad del método se ha confirmado utilizando 25 cepas de bacterias diana y 18 cepas de otras bacterias comunes a las semillas de soja como endófitos. Se ha demostrado que la PCR multiplex en tiempo real desarrollada tiene una alta sensibilidad: se obtuvo un resultado positivo a 0,01 ng/µl de ADN para ambos organismos diana, y a 100 UFC/ml de bacterias en homogeneizado de semillas de soja. La solidez de la PCR multiplex en tiempo real desarrollada se ha verificado mediante la detección de los patógenos en 25 cepas de semillas comerciales, en comparación con protocolos de PCR publicados anteriormente. En todas las pruebas, tres cepas de semillas resultaron positivas y 22 negativas. La PCR multiplex en tiempo real puede aplicarse en la práctica del diagnóstico para la detección simultánea de dos patógenos importantes de las leguminosas.

• Materias:Acetamida
• Subjects:Acetamida
• Palabras claves:Pseudomonas savastanoi; Curtobacterium flaccumfaciens; PCR; Soya; Enfermedades bacterianas
• Keywords:Pseudomonas savastanoi; Curtobacterium flaccumfaciens; PCR; Soybean; Bacterial diseases