Resumen

Las muestras biológicas presentan diversas complejidades, desde proteínas purificadas homogéneas hasta mezclas multicomponente. La calificación precisa de tales muestras es primordial para las aplicaciones posteriores. Describimos el desarrollo de un método analítico basado en espectroscopia MIR que ofrece la cuantificación simultánea de proteínas (0,25-5 mg/mL) y el análisis de especies totales de lípidos o detergentes, así como la identificación de otras biomoléculas presentes en muestras biológicas. El método utiliza una membrana hidrófila de PTFE diseñada para la presentación de muestras acuosas en un formato seco compatible con el análisis rápido por infrarrojos. A diferencia de las técnicas clásicas de cuantificación, el método descrito es independiente de la secuencia de aminoácidos y, por tanto, aplicable a muestras complejas de composición desconocida. En comparación con las plataformas existentes, este método basado en MIR permite la cuantificación directa utilizando un volumen mínimo de muestra (2 µl); es muy adecuado cuando el acceso repetido y el tamaño limitado de la muestra son parámetros críticos. Además, se pueden obtener resultados precisos sin formación especializada ni conocimientos de espectroscopia IR. En general, la aplicación simplificada y el sistema de análisis proporcionan una alternativa más rentable a los sistemas IR de alto rendimiento para los laboratorios de investigación con demandas mínimas de rendimiento. En resumen, el sistema basado en MIR proporciona una alternativa viable a los métodos actuales de cuantificación de proteínas; también ofrece de forma única la cualificación simultánea de otros componentes, especialmente lípidos y detergentes.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Electroquímica Farmacocinética Análisis espectroquímico
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Electrochemistry Pharmacokinetics Spectrochemical analysis
• Palabras claves:método, métodos actuales de cuantificación de proteínas, secuencia de aminoácidos, técnicas clásicas de cuantificación, análisis rápido por infrarrojos, membrana hidrófila de ptfe, tamaño de muestra limitado, volumen de muestra mínimo, exigencias mínimas de rendimiento, cuantificación simultánea de proteínas
• Keywords:method, current protein quantitation methods, amino acid sequence, classical quantification techniques, fast infrared analysis, hydrophilic ptfe membrane, limited sample size, minimal sample volume, minimal throughput demands, simultaneous protein quantitation