Actualmente está bien establecido que las alteraciones del ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) desempeñan un papel importante en la transformación metabólica que se produce en el cáncer, incluido el de próstata. Se ha desarrollado un método para el análisis cualitativo y cuantitativo simultáneo de los intermediarios del ciclo del TCA en fluidos corporales, tejidos y líneas celulares cultivadas de origen humano utilizando una columna común de fase inversa C18 mediante la técnica LC-MS/MS. Este método LC-MS/MS para el perfilado de intermediarios del ciclo del TCA ofrece ventajas significativas, incluyendo la preparación sencilla y rápida de una amplia gama de muestras biológicas humanas. El método analítico se validó de acuerdo con las directrices del Comité de Métodos Analíticos de la Royal Society of Chemistry. Los límites de detección fueron inferiores a 60 nM para la mayoría de los intermediarios del TCA, con la excepción de los ácidos láctico y fumárico. Las curvas de calibración de todos los analitos de TCA mostraron linealidad con coeficientes de correlación r2>0,9998. Las recuperaciones fueron >95 para todos los analitos de TCA. Este método se estableció teniendo en cuenta los problemas y limitaciones de las técnicas existentes. Prevemos que su aplicación a diferentes matrices biológicas facilitará una comprensión más profunda de los cambios metabólicos en el ciclo del TCA a partir de estudios in vitro, ex vivo e in vivo.
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