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Development of HPLC Protocol and Simultaneous Quantification of Four Free Flavonoids from Dracocephalum heterophyllum Benth.Desarrollo de un protocolo de HPLC y cuantificación simultánea de cuatro flavonoides libres de Dracocephalum heterophyllum Benth.

Resumen

Se ha realizado por primera vez la cuantificación de los cuatro flavonoides, a saber, luteolina, kaempferol, diosmetina y crisosplenetina, en el extracto 80thanólico de Dracocephalum heterophyllum B. mediante HPLC acoplado a un detector UV tras optimizar el disolvente de extracción y las condiciones cromatográficas. Los flavonoides totales cuantificados fueron 0,324 mg/mL del extracto. El análisis por HPLC arrojó contenidos de luteolina, kaempferol, diosmetina y crisosplenetina como 0,08%, 0,14%, 0,28% y 0,79% del extracto seco, respectivamente. Los valores LOD (%) calculados fueron 0,04, 0,03, 0,03 y 0,08 y los valores LOQ (%) fueron 0,08, 0,12, 0,11 y 0,28 para la luteolina, el kaempferol, la diosmetina y la crisosplenetina, respectivamente. Los porcentajes de recuperación de estos flavonoides estaban dentro del rango aceptable del 95% al 105%. Se calculó la desviación estándar y el %RSD para cada analito objetivo individualmente en el extracto para determinar la reproducibilidad y la precisión del método. En ningún caso el %RSD fue superior a 1 tomando como factor el tiempo de retención, mientras que en el caso del área bajo la curva se observó un %RSD máximo en el caso de la diosmetina de 2,85. De nuestra revisión bibliográfica sobre las especies vegetales estudiadas, se desprende que estos flavonoides no han sido cuantificados antes y se presentan por primera vez en este trabajo.

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