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Artículo

SRM-MS Method Development for Hepcidin-25 PeptideDesarrollo del método SRM-MS para el péptido Hepcidin-25

Resumen

Dado que el análisis avanzado de la hepcidina basado en la espectrometría de masas (EM) permite superar las limitaciones de los métodos analíticos que utilizan antihepcidina, una mejora adicional de la sensibilidad de detección del péptido mediante EM puede aumentar el valor diagnóstico de la hepcidina para diversos trastornos relacionados con el hierro. Aquí, la mejora de la sensibilidad de detección por EM de la hepcidina se ha logrado mediante la reducción de los enlaces disulfuro en la hepcidina, por lo que aumentó la accesibilidad de protones, en comparación con el péptido hepcidina intacto. Comparando las eficiencias de ionización de las formas reducidas y no reducidas de la hepcidina, la forma reducida de la hepcidina mostró un aumento en la eficiencia de ionización de más de dos veces en comparación con la forma no reducida de la hepcidina. También demostramos una mejora de la sensibilidad de detección del péptido en el ensayo SRM. Observamos una mejora significativa de la sensibilidad de detección en la plataforma MS de triple cuadrupolo, que la eficiencia de ionización aumentó al menos dos veces más, y que el límite de detección (LOD) aumentó más de 10 veces en los rangos de concentración de 1 fmol a 10 fmol de hepcidina. En este estudio, demostramos la utilidad de la modificación de la hepcidina para la mejora general de las eficiencias de ionización del péptido de la hepcidina en el ensayo de medición cuantitativa basado en MS.

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