Resumen

El ácido úrico y la hipoxantina se producen en el catabolismo de las purinas. Los niveles anormales de estos productos en la orina se asocian a muchas enfermedades, por lo que es necesario disponer de un método sencillo y rápido para detectarlos. Por ello, presentamos una técnica sencilla de cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa (HPLC/UV), desarrollada y validada para el análisis simultáneo de ácido úrico, hipoxantina y creatinina en orina humana. La orina se diluyó adecuadamente y se eluyó con una columna C-18 de 100 mm × 4,6 mm con una precolumna C-18 de 25 mm × 4,6 mm en serie. Se empleó tampón de fosfato de potasio (20 mM, pH 7,25) a un caudal de 0,40 mL/min como disolvente y los picos se detectaron a 235 nm. Se utilizó tirosina como patrón interno. Las condiciones experimentales ofrecieron una buena separación de los analitos sin interferencia de sustancias endógenas. Las curvas de calibración fueron lineales para todos los compuestos de prueba con un coeficiente de regresión, r2>0,99. El ácido úrico, la creatinina, la tirosina y la hipoxantina se eluyeron a 5,2, 6,1, 7,2 y 8,3 minutos, respectivamente. La variabilidad intradiaria e interdiaria fue inferior a 4,6 para todos los analitos investigados y la recuperación osciló entre el 98 y el 102%. El procedimiento de HPLC propuesto es un método sencillo, rápido y de bajo coste con una gran precisión y un uso mínimo de disolventes orgánicos. Este método se aplicó con éxito para la determinación de creatinina, hipoxantina y ácido úrico en orina humana.

• Materias:Análisis cromatográfico Polímeros Nanopartículas Química farmacéutica Método espectrofotométrico
• Subjects:Chromatographic analysis Polymers Nanoparticles Chemistry pharmaceutical Spectrophotometric method
• Palabras claves:ácido úrico, mm, orina humana, hipoxantina, tampón fosfato de potasio, procedimientos hplc propuestos, cromatografía líquida de rendimiento, nivel urinario anormal, métodos de bajo coste, determinación de la creatinina
• Keywords:uric acid, mm, human urine, hypoxanthine, potassium phosphate buffer, proposed hplc procedures, performance liquid chromatography, abnormal urinary level, low cost methods, determination of creatinine