La contaminación por plomo y cromo representa uno de los problemas más graves en los medios acuáticos. El objetivo de este trabajo fue desarrollar y validar un método preciso, sensible y rápido para la determinación simultánea de Pb y Cr a niveles traza en tejidos y grasa de organismos marinos como la tortuga (Chelonia mydas), el tiburón (Rhizoprionodon terraenovae) y el delfín (Tursiops truncatus), utilizando la espectroscopia de fluorescencia de rayos X de reflexión total (TXRF). Las soluciones de trabajo se prepararon en 10 mL de una solución 0,005 mol-L-1 de EDTA y 1 mol-L-1 de HNO3. Para corregir posibles derivas del instrumento, se utilizaron 20 μg-L-1 de galio como patrón interno (IS). Los resultados mostraron que el método TXRF era lineal en los rangos de concentración de 5,242-100 μg-L-1 para Pb y 2,363-100 μg-L-1 para Cr. Los límites de detección (LOD) alcanzados fueron 1,573 y 0,709 μg-L-1 para Pb y Cr, respectivamente, mientras que los límites de cuantificación alcanzados fueron 5,242 μg-L-1 para Pb y 2,363 μg-L-1 para Cr. El método validado fue lo suficientemente exacto y preciso para la determinación de estos metales pesados en muestras de organismos marinos, como indican los valores aceptables de recuperación entre 90-101%. Además, se analizaron satisfactoriamente un material de referencia certificado (BCR-279, lechuga de mar) y una tableta Centrum, y la prueba T de comparación de medias reveló que no había diferencias significativas al nivel de confianza del 95 entre los valores obtenidos con el método TXRF propuesto y los valores certificados. La repetibilidad del método, expresada como desviación estándar relativa (RSD), fue del 5,1 y 4%, para Pb y Cr, respectivamente. Además, otras características del método desarrollado fueron un bajo volumen de muestra de 10 μL, y la frecuencia de muestreo alcanzada fue de 20 h-1.
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