Resumen

El factor de iniciación de la traducción 5A (IF5A) es esencial y está muy conservado en Eukarya (eIF5A) y Archaea (aIF5A). La actividad de IF5A requiere hipusina, una modificación postraduccional sintetizada en Eukarya a partir del precursor de la poliamina espermidina. Los análisis de las poliaminas intracelulares revelaron que la agmatina y la cadaverina eran las principales poliaminas producidas en Haloferax volcanii en medio mínimo, lo que plantea la cuestión de cómo se sintetiza la hipusina en esta Archaea halófila. La reconstrucción metabólica condujo a una imagen tentativa del metabolismo de las poliaminas y de la modificación de la aIF5A en Hfx. volcanii que se comprobó experimentalmente. El análisis de la aIF5A de Hfx. volcanii por LC-MS/MS reveló que estaba exclusivamente desoxihipusinilada. Los estudios genéticos confirmaron el papel del gen predicho de la arginina descarboxilasa (HVO_1958) en la síntesis de agmatina. El gen similar a la agmatinasa (HVO_2299) resultó ser esencial, en consonancia con un papel en la modificación de aIF5A predicho por las pruebas de agrupación física. Se demostró que la desoxihipusina sintasa (DHS) recombinante de S. cerevisiae transfiere la fracción 4-aminobutílica de la espermidina a la aIF5A de Hfx. volcanii in vitro. Sin embargo, al menos en las condiciones probadas, esta transferencia no se observó con el DHS de Hfx. volcanii. Además, el crecimiento de Hfx. volcanii no fue inhibido por el inhibidor clásico del DHS GC7. Proponemos un modelo de síntesis de desoxihipusina en Hfx. volcanii que difiere de la vía canónica eucariótica, lo que abre el camino a nuevos estudios.

• Materias:Enzimas Microbiología Aguas residuales Arqueas metanogénico
• Subjects:Enzymes Microbiology Sewage Archeas methanogenic
• Palabras claves:volcanii, hfx, modificación de aif5a, factores de iniciación de la traducción, factores de iniciación 5a, gen de la arginina descarboxilasa, análisis de poliaminas intracelulares, pruebas de agrupación física, análisis de aif5a, inhibidores clásicos de la dhs
• Keywords:volcanii, hfx, aif5a modification, translation initiation factors, initiation factors 5a, arginine decarboxylase gene, intracellular polyamine analysis, physical clustering evidence, analysis of aif5a, classical dhs inhibitors