Resumen

Se ha desarrollado un inmunoensayo de fluorescencia competitivo para la identificación y cuantificación de morfina sobre la base del formato de placa recubierta de hapteno. El hapteno se preparó mediante la conjugación covalente de un derivado de la morfina con albúmina bovina. En el inmunoensayo, el hapteno se inoculó en una placa de 96 pocillos y luego se unió con anticuerpos monoclonales marcados con un colorante indicador de señal, isotiocianato de fluoresceína (FITC). Los anticuerpos FITC no unidos se enjuagaron de la placa. La intensidad de la fluoresceína disminuye en presencia de moléculas de morfina debido a la unión competitiva con los anticuerpos contra el hapteno. La intensidad está inversamente correlacionada con la concentración de morfina. En el análisis cuantitativo para muestras de orina, obtuvimos un rango de linealidad de 0,2 μg/mL∼2,5 μg/mL, junto con un límite de detección de c.a. 1 ng/mL. El inmunoensayo de fluorescencia muestra una baja reactividad cruzada (inferior al 10%) con la 6-acetilmorfina, la 3-acetilmorfina y la heroína. El método desarrollado produjo resultados comparables al método estándar GC-MS/MS. En conclusión, se ha establecido una herramienta de cribado rápida y eficaz para la morfina en orina humana clínica.

• Materias:Análisis cromatográfico Estructura molecular Análisis químico Farmacocinética Voltamperometría
• Subjects:Chromatographic analysis Molecular structure Chemical test Pharmacokinetics Voltammetry
• Palabras claves:hapteno, morfina, orina humana clínica, inmunoensayo de fluorescencia competitivo, herramienta de cribado eficaz, acetilmorfina, anticuerpos, método ms, fitc no unido, albúmina bovina
• Keywords:hapten, morphine, clinical human urine, competitive fluorescence immunoassay, efficient screening tool, acetylmorphine, antibodies, ms method, unbound fitc, albumin bovine