Resumen

Es bien sabido que los reactivos de acoplamiento iónico provocan la supresión de iones en los métodos LC-MS/MS. En este caso, se ha observado que el ácido tricloroacético aumenta la señal MS de la tobramicina. Para apoyar los estudios de un simulador farmacocinético/farmacodinámico in vitro de biopelículas bacterianas, se desarrolló un método LC-MS/MS para la determinación de tobramicina en medio M9. Se mezclaron alícuotas de 25 μL de muestras de medio M9 con el patrón interno (IS) tobramicina-d5 (5 µg/mL, 25 µL) y 200 µL de ácido tricloroacético al 2,5%. La mezcla (5 µL) se inyectó directamente en una columna PFP (2,0 × 50 mm, 3 µm) eluida con agua que contenía 20 mM de formiato de amonio y 0,14% de ácido trifluoroacético y acetonitrilo que contenía 0,1% de ácido trifluoroacético en modo gradiente. Para la cuantificación se utilizaron ESI y MRM con iones m/z 468 → 324 para la tobramicina y m/z 473 → 327 para el IS. El rango de concentración de la curva de calibración fue de 50-25000 ng/mL. El efecto matriz del medio M9 no fue significativo en comparación con los disolventes de inyección, pero el aumento de la señal por el ácido tricloroacético fue significativo (∼3 veces). El método es sencillo, rápido y fiable. Utilizando el método, se probó el modelo PK/PD in vitro con una dosis en bolo de tobramicina.

• Materias:Análisis cromatográfico Química farmacéutica Estructura molecular Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Molecular structure Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:tobramicina, ácido tricloroacético, medio m9, ácido trifluoroacético, intervalo de concentración de la curva de calibración, μl de muestras de medio m9, ml. efecto matriz, mm de formiato de amonio, método, método ms.
• Keywords:tobramycin, trichloroacetic acid, m9 media, trifluoroacetic acid, calibration curve concentration range, μl m9 media samples, ml. matrix effect, mm ammonium formate, method, ms method