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HPLC Method Determination of Isoliquiritin Apioside and Isoliquiritin in Rat Plasma for Application in Pharmacokinetic Study after an Oral Administration of Zhigancao ExtractDeterminación por Método HPLC de Isoliquiritin Apioside e Isoliquiritin en Plasma de Rata para Aplicación en Estudio Farmacocinético después de una Administración Oral de Extracto de Zhigancao

Resumen

Se desarrolló un método sensible de HPLC para la determinación cuantitativa del apiósido de isoliquiritina (ILA) y la isoliquiritina (IL) en plasma de rata. Tras la precipitación de proteínas con acetonitrilo, se utilizó cloroformo para separar las impurezas solubles en lípidos de las muestras de plasma y eliminar el acetonitrilo. Se realizó una cromatografía en una columna analítica Diamonsil C18 (150×4,6 mm; 5 μm), utilizando una fase móvil compuesta por agua (que contenía ácido fosfórico al 0,1%, v/v); acetonitrilo (72 : 28, v/v) a un caudal de 1,0 mL/min. La tecnología de cambio de longitud de onda se realizó para determinar ILA e IL a 360 nm y wogonoside (estándar interno, IS) a 276 nm. Las curvas de calibración de ILA e IL fueron bastante lineales en los rangos de concentración de 0,060-3,84 μg/mL (r=0,9954) y 0,075-4,80 μg/mL (r=0,9968), respectivamente. Las recuperaciones medias de extracto de ILA, IL e IS fueron todas superiores al 80%. La precisión y exactitud para todas las concentraciones de los controles de calidad y estándares estuvieron dentro del 15%. El límite inferior de cuantificación (LLOQ) fue de 0,060 μg/mL para ILA y 0,075 μg/mL para IL. El método se utilizó en un estudio farmacocinético tras una administración oral de extracto de Zhigancao a ratas.

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