Resumen

La célula es la unidad básica de estructura y función de todos los organismos vivos. El estudio de la distribución de la concentración intracelular del fármaco es útil para comprender la eficacia del fármaco en el lugar de destino. El pemetrexed es un nuevo antagonista del folato multiobjetivo con un grupo de pirrolidina como estructura central. Se desarrolló un método de cromatografía líquida de ultra alto rendimiento y espectrometría de masas en tándem (UHPLC-MS/MS) para la cuantificación rápida de la concentración de pemetrexed en células de cáncer de mama humano (MCF-7). El pretratamiento de la muestra se completó con la precipitación de proteínas utilizando metanol. La separación cromatográfica optimizada se logró en una columna ZORBAX SB-C18 (2,1 × 150 mm, 3,5 μm). La columna se equilibró con la fase móvil inicial y se eluyó bajo fases de gradiente que contenían ácido 0,1órmico en agua (fase A) y en acetonitrilo (fase B). El programa de gradiente comenzó a 5, aumentó a 95 en 2 minutos y luego se mantuvo a 95 durante 1,5 minutos. El rango lineal del pemetrexed en las células y el núcleo fue de 2,0-200,0 ng/mL, mientras que en la muestra del medio fue de 50,0-5000,0 ng/ml, y los coeficientes de correlación fueron todos superiores a 0,99. La recuperación fue de 47,50-67,55% (2,0-200,0 ng/mL) y de 82,72-97,15% (50,0-5000,0 ng/mL), y el efecto de matriz fue de 98,10-100,62% (2,0-200,0 ng/mL) y de 89,78-97,65% (50,0-5000,0 ng/mL). La precisión interdiaria y la precisión intradiaria (RSD%) fueron inferiores al 15,0% (para el LLOQ, inferiores al 20%), y la exactitud (RE%) estuvo dentro del ±15%; la desviación de la estabilidad estuvo dentro del ±15%, todo ello cumpliendo los requisitos del análisis de muestras biológicas. Los resultados de las muestras intracelulares mostraron que la concentración de pemetrexed alcanzó su pico a las 3 h de la administración. La concentración de pemetrexed en el núcleo siguió aumentando 2 h después de la administración y puede haber alcanzado la concentración máxima a las 6 h.

• Materias:Análisis cromatográfico Nanopartículas Fitoquímicos Análisis fitoquímico Método espectrofotométrico
• Subjects:Chromatographic analysis Nanoparticles Phytochemicals Phytochemical analysis Spectrophotometric method
• Palabras claves:ml, distribución de la concentración del fármaco, desviación de la estabilidad, espectrometría de masas en tándem, concentración de pemetrexed, célula de cáncer de mama, 2,0-200,0, ng, unidad de estructura, análisis de muestras biológicas
• Keywords:ml, drug concentration distribution, deviation of stability, tandem mass spectrometry, concentration of pemetrexed, breast cancer cell, 2.0–200.0, ng, unit of structure, biological sample analysis