Resumen

Se estableció y validó un método dirigido de cromatografía líquida de ultra alta resolución-espectrometría de masas en tándem (UHPLC-MS/MS) para la determinación simultánea de 34 aminoácidos en muestras de tejido de pacientes con cáncer colorrectal (CCR). La separación cromatográfica se logró en una columna Agilent ZORBAX SB-C18 (3,0 × 150 mm, 5 μm) con un sistema de elución de gradiente binario (A, 0,02% de ácido heptafluorobutírico y 0,2 de ácido mórmico en agua, v/v; B, metanol). El tiempo de ejecución fue de 10 min. Se eligió el modo de monitorización de reacciones múltiples con una fuente de ionización por electrospray que funcionaba en el modo de ionización positiva para la adquisición de datos. Los coeficientes de correlación lineal fueron >0,99 para todos los analitos en sus rangos de calibración correspondientes. La muestra se pretrató a base de homogeneizado tisular y precipitación de proteínas con una muestra alícuota de 100 mg. La recuperación media y el efecto matriz para 34 aminoácidos y 3 patrones internos fueron 39,00%∼146,95 y 49,45%∼173,63%, respectivamente. La precisión intra e interdiaria para todos los analitos osciló entre -13,52% y 14,21% (RSD ≤8,57%) y entre -14,52% y 12,59% (RSD ≤10,31%), respectivamente. Las desviaciones de estabilidad bajo diferentes condiciones estuvieron dentro de ±15para todos los analitos. Este método se aplicó a la cuantificación simultánea de 34 aminoácidos en muestras de tejido de 94 pacientes con CCR.

• Materias:Análisis cromatográfico Electroquímica Análisis químico Farmacocinética Análisis espectroquímico
• Subjects:Chromatographic analysis Electrochemistry Chemical test Pharmacokinetics Spectrochemical analysis
• Palabras claves:aminoácidos, analitos, muestras de tejido, sistema de elución en gradiente binario, modo de monitorización de reacción múltiple, agilent zorbax sb, fuente de ionización electrospray, coeficientes de correlación lineal, muestra alícuota en mg, cromatografía líquida de alto rendimiento
• Keywords:amino acids, analytes, tissue samples, binary gradient elution system, multiple reaction monitoring mode, agilent zorbax sb, electrospray ionization source, linear correlation coefficients, mg aliquot sample, performance liquid chromatography