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Simultaneous Determination of Cortisol and Cortisone from Human Serum by Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryDeterminación simultánea de cortisol y cortisona en suero humano mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem

Resumen

Se validó un método rápido, sensible y selectivo de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) y, a continuación, se determinaron los niveles de cortisol y cortisona de sueros de adultos sanos mediante el método LC-MS/MS. Se extrajeron directamente 100 μL de muestra de suero añadiendo 2 mL de acetato de etilo, seguido de separación cromatográfica en una columna C18 con una fase móvil consistente en acetato de amonio 5 mM y metanol (25 : 75, v/v). La precisión, exactitud y recuperación media del método fueron 1,5-5,3%, 95,4-102,5% y 96,4 para el cortisol, y 1,9-6,0%, 89,2-98,8% y 79,9 para la cortisona, respectivamente. El método fue lineal de 1.0 a 500.0 ng/mL r 2 = 0.999 para cortisol y de 2.5 a 100.0 ng/mL r 2 = 0.998 para cortisona. Los límites de detección (LOD) y cuantificación (LOQ) fueron de 0,2 y 1,0 ng/mL para el cortisol, y de 1,0 y 2,5 ng/mL para la cortisona, respectivamente. La concentración media de cortisol ( 133,9 ± 63,7 ng/mL) de las muestras recogidas entre las 9:00 y las 11:00 a.m. fue aproximadamente 4,4 veces superior a la de cortisona ( 30,5 ± 10,7 ng/mL) P < 0,0001 . La relación media cortisona/cortisol fue de 0,225. Por lo tanto, el método LC-MS/MS puede ser útil para el diagnóstico de algunas enfermedades suprarrenales y la evaluación de la actividad de la 11β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11β-HSD) en los laboratorios clínicos.

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