Resumen

Este estudio presenta un método de fluorescencia para la detección de trifosfato de adenosina (ATP) basado en una baliza molecular (MB) de nanoclústeres de Ag sin etiqueta y de alta sensibilidad. El sensor contiene una MB en forma de horquilla, dos hebras cortas de ADN monocatenario y ADN ligasa T4. La MB consta de tres partes, que son la secuencia de ADN molde para sintetizar nanoclusters de Ag en el extremo 5′, el ADN intermedio con una estructura en forma de horquilla y la secuencia de ADN rica en bases de guanina en el extremo 3′. El sensor muestra una alta intensidad de fluorescencia en ausencia de ATP. Sin embargo, cuando la sonda se utiliza para la detección de ATP, las dos secuencias cortas de ADN en el sensor formarían una secuencia larga por reacción de ligación enzimática; esta secuencia larga abre la estructura en forma de horquilla del MB y disminuye la fluorescencia del sistema. En condiciones analíticas óptimas, se observa una clara relación lineal entre la concentración de ATP y la intensidad de fluorescencia en el intervalo de 0,1-10 μM. Se evalúa la interferencia que presentan otras moléculas pequeñas durante la detección de ATP, y los resultados confirman la buena selectividad del sensor propuesto. En comparación con los métodos tradicionales, el sensor es libre de etiquetas, fácil de operar, barato y altamente sensible.

• Materias:Análisis cromatográfico Estructura molecular Análisis químico Farmacocinética Voltamperometría
• Subjects:Chromatographic analysis Molecular structure Chemical test Pharmacokinetics Voltammetry
• Palabras claves:sensor, detección de atp, secuencia larga, t4 dna ligasa, relación lineal clara, reacción enzimática de ligación, alta intensidad de fluorescencia, baliza molecular nanocluster, condiciones analíticas óptimas, otras moléculas pequeñas
• Keywords:sensor, atp detection, long sequence, t4 dna ligase, clear linear relationship, enzymatic ligation reaction, high fluorescence intensity, nanocluster molecular beacon, optimal analytical conditions, other small molecules