Resumen

La N3-metiladenina (3-mA) es una lesión citotóxica formada por la reacción del ADN con muchos agentes metilantes, incluidos fármacos antineoplásicos, agentes ambientales y compuestos generados endógenamente. La toxicidad del 3-mA se ha atribuido a su capacidad para bloquear la polimerización del ADN. Utilizando Me-lex, un compuesto que reacciona selectiva y eficientemente con el ADN para producir 3-mA, hemos observado en levadura un punto caliente mutacional en el 5′-terminal de un tracto A4. Con el fin de explorar el papel potencial de la derivación de la secuencia dependiente de la ADN polimerasa de 3-mA, hemos desarrollado un sistema in vitro para preparar sustratos modificados con 3-mA utilizando Me-lex. Detallamos los efectos de 3-mA, su análogo isostérico estable, 3-metil-3-deazaadenina, 3-deazaadenina y un sitio abásico THF sobre la polimerización del ADN dentro de una secuencia A4. El grupo metilo en 3-mA y 3-metil-3-deazaadenina tiene un pronunciado efecto inhibidor sobre la polimerización del ADN. No hubo selectividad de secuencia para la derivación de ninguna de las lesiones, excepto para el sitio abásico, que se derivó más eficientemente cuando estaba en el 5′-terminal del tracto A4. Los resultados indican que el débil patrón mutacional inducido por el Me-lex puede ser el resultado de la depurinación de 3-mA a un sitio abásico que se evita en un contexto dependiente de la secuencia.

• Materias:Pliegue de Proteína Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Ácidos nucleicos Reparación del ADN Daño del ADN
• Subjects:Protein Folding Polymerase chain reaction Nucleic acids DNA Repair DNA Damage
• Palabras claves:polimerización del adn, sitio abásico, deazaadenina, lex, tracto a4, derivación dependiente de la adn polimerasa, análogo estable del isóster, patrón mutacional débil, adn, secuencia
• Keywords:dna polymerization, abasic site, deazaadenine, lex, a4 tract, dependent dna polymerase bypass, stable isostere analogue, weak mutational pattern, dna, sequence