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Effects of Stability of Base Pairs Containing an Oxazolone on DNA ElongationEfectos de la estabilidad de los pares de bases que contienen una oxazolona en la elongación del ADN

Resumen

El nucleósido 2,2,4-triamino-5(2H)-oxazolona (Oz) puede ser el resultado de un daño oxidativo en los residuos de guanina del ADN. A pesar de las diferencias entre las tres polimerasas (Pol β, KF exo-, y Pol η) con respecto a los patrones de incorporación de nucleótidos opuestos a Oz, las tres polimerasas pueden incorporar guanina opuesta a Oz. Basándonos en cálculos ab initio, propusimos una estructura para un par de bases Oz:G estable. Para evaluar la estabilidad de cada par de bases que contiene Oz (Oz:G, Oz:A, Oz:C y Oz:T) durante la replicación del ADN, determinamos la eficiencia de la extensión del cebador catalizada por Pol β-, KF exo-- o Pol η más allá de cada par de bases. Con cada polimerasa, la extensión más allá de Oz:G fue más eficiente que la más allá de Oz:A, Oz:C, o Oz:T. Además, los estudios de desnaturalización térmica revelaron que el valor de T m para el dúplex que contenía Oz:G era significativamente mayor que los obtenidos para los dúplex que contenían Oz:A, Oz:C u Oz:T. Por lo tanto, los resultados de los cálculos ab initio junto con los de los ensayos de replicación del ADN y los experimentos de desnaturalización térmica apoyaron la conclusión de que Oz:G es el más estable de los pares de bases que contienen Oz.

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