Resumen

Los cardiomiocitos derivados de células madre pluripotentes humanas (hPSC) tienen aplicaciones potenciales en el descubrimiento de fármacos, pruebas de toxicidad, estudios de desarrollo y medicina regenerativa. Antes de poder utilizar estas células de forma fiable, es necesario caracterizar su funcionalidad para establecer su similitud con los cardiomiocitos nativos. Hemos seguido perlas fluorescentes incrustadas en hidrogeles de poliacrilamida de 4,4-99,7 kPa bajo cardiomiocitos neonatales de rata en contracción y cardiomiocitos generados a partir de hPSC mediante diferenciación dirigida inducida por factores de crecimiento para medir la producción contráctil en respuesta a cambios en la mecánica del sustrato. El estrés de contracción se determinó mediante microscopía de fuerza de tracción, y la morfología se caracterizó mediante inmunocitoquímica para α-actinina y posterior análisis de imagen. Se observó que el estrés de contracción de todos los tipos de cardiomiocitos aumentaba con la rigidez del sustrato. Este efecto no estaba relacionado con la frecuencia de latido ni con la morfología. Demostramos que la contractilidad de los cardiomiocitos derivados de hPSC respondía adecuadamente a la isoprenalina y permanecía estable en cultivo durante un periodo de 2 meses. Este estudio demuestra que los cardiomiocitos derivados de hPSC tienen respuestas funcionales apropiadas a la rigidez del sustrato y a un agente farmacéutico, lo que motiva su uso en otras aplicaciones como la evaluación de fármacos y terapias cardiacas.

• Materias:Genes mitocondriales Proliferación celular Receptor celular Autofagia Receptor de células
• Subjects:Mitochondrial genes Cell proliferation Cellular receiver Autophagy Cell receptor
• Palabras claves:cardiomiocitos, rigidez del sustrato, célula madre pluripotente humana, respuestas funcionales adecuadas, hidrogeles de poliacrilamida kPa, cardiomiocitos de rata neonatal, análisis de imagen posterior, microscopía de fuerza de tracción, morfología, tensión de contracción.
• Keywords:cardiomyocytes, substrate stiffness, Human pluripotent stem cell, appropriate functional responses, kPa polyacrylamide hydrogels, neonatal rat cardiomyocytes, subsequent image analysis, traction force microscopy, morphology, Contraction stress