Las mutaciones rápidas de las proteínas diana de la terapia contra el cáncer suelen provocar resistencia a los fármacos. A menudo, la mutación afecta directamente al sitio de unión de un fármaco, bloqueando eficazmente la unión del fármaco, pero estas mutaciones pueden tener otros efectos, como cambiar la vida media de recambio de la proteína. Utilizando SILAC MS, hemos medido las tasas de recambio celular de una importante diana del cáncer de pulmón no microcítico, el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Se analizaron el EGFR de tipo salvaje (WT), el EGFR con un único mutante activador (Del 746-750 o L858R) y el doble mutante resistente a fármacos (L858R/T790M). En las líneas celulares de cáncer de pulmón no microcítico, las tasas de recambio del EGFR oscilaron entre 28 horas en las células A431 (WT) y 7,5 horas en las células PC-9 (mutante Del 746-750). La medición de la tasa de recambio del EGFR en células PC-9 dosificadas con inhibidores irreversibles presenta una complejidad adicional debido a los efectos de los inhibidores sobre la viabilidad celular, por lo que los resultados se presentan en forma de intervalo. Por último, se midió el reciclaje de aminoácidos esenciales (K y R) en diferentes líneas celulares. El reciclaje fue diferente en cada línea celular, pero la inclusión global del efecto del reciclaje de aminoácidos en el cálculo de las tasas de recambio del EGFR dio como resultado una reducción de las tasas del 10-20%.
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