Resumen

Para evaluar los métodos de análisis de los efectos genotóxicos en líneas celulares de mamíferos, probamos el efecto de tres agentes genotóxicos comunes en células de ovario de hámster chino (CHO) mediante electroforesis en gel unicelular (ensayo cometa) y cromatografía de gases-espectrometría de masas en tándem (GC-MS/MS). Las células CHO cultivadas en suspensión se incubaron por separado con etopósido, bleomicina y metanosulfonato de etilo y se analizaron mediante un ensayo cometa alcalino y GC-MS/MS. Aunque se detectaron roturas de la cadena de ADN mediante el ensayo cometa tras el tratamiento con los tres agentes, la GC-MS/MS sólo pudo detectar lesiones nucleobásicas del ADN inducidas oxidativamente por la bleomicina. Esto demuestra que, aunque la GC-MS/MS tiene limitaciones en la detección de efectos genotóxicos, puede utilizarse para genotoxinas químicas seleccionadas que contribuyen a procesos oxidantes. El ensayo cometa, utilizado en combinación con GC-MS/MS, puede ser un enfoque más útil para cribar una amplia gama de genotoxinas químicas, así como para monitorizar otros factores que dañan el ADN.

• Materias:Ingeniería genética Ácido desoxirribonucleico (ADN) Cultivo Celular Ácidos nucleicos Daño del ADN
• Subjects:Genetic engineering Deoxyribonucleic acid (DNA) Cell Culture Nucleic acids DNA Damage
• Palabras claves:ensayo cometa, genotoxinas químicas, efectos genotóxicos, ovario de hámster chino, lesiones de nucleobase de adn, roturas de cadena de adn, ensayo cometa alcalino, electroforesis en gel celular, agentes genotóxicos comunes, líneas celulares de mamíferos
• Keywords:comet assay, chemical genotoxins, genotoxic effects, chinese hamster ovary, dna nucleobase lesions, dna strand breaks, alkaline comet assay, cell gel electrophoresis, common genotoxic agents, mammalian cell lines