Resumen

El mantenimiento de la viabilidad celular in vivo e in vitro es una cuestión crítica en la ingeniería de tejidos óseos tridimensionales. Aunque el uso de cocultivos de células osteoblásticas/endoteliales en construcciones tridimensionales ha resultado prometedor para aumentar la vascularización in vivo, el mantenimiento in vitro de la viabilidad celular sigue siendo problemático. En este estudio se utilizó el flujo de perfusión para aumentar la expresión génica osteogénica y angiogénica, disminuir la expresión génica hipóxica y aumentar la cobertura celular y de la matriz en los cocultivos de células osteoblásticas/endoteliales. Se cultivaron células similares a los osteoblastos de ratón (MC3T3-E1) solas y en cocultivo con células endoteliales microvasculares de ratón (EOMA) en andamios tridimensionales durante 1, 2, 7 y 14 días con o sin flujo de perfusión. Se determinaron los niveles de ARNm de varios genes osteogénicos, angiogénicos y relacionados con la hipoxia, y se realizaron análisis histológicos. El flujo de perfusión redujo los genes relacionados con la hipoxia (HIF-1α, VEGF y OPN) en los primeros momentos, aumentó los genes osteogénicos (ALP y OCN) a los 7 días y redujo el ARNm de RUNX-2 y VEGF a los 14 días en los monocultivos de osteoblastos. El flujo de perfusión aumentó el número de células, la cobertura del perímetro del andamio y el área de la matriz en el centro de los andamios a los 14 días. Además, el flujo de perfusión aumentó la longitud de las agregaciones de células endoteliales dentro de los cocultivos. Esto sugiere que los cocultivos estimulados por perfusión proporcionan un medio para aumentar la actividad osteogénica y angiogénica.

• Materias:Injerto de tejidos Biomateriales Técnica In Vitro Prótesis e Implantes Ingeniería de tejidos
• Subjects:Bone grafting Biomaterials In Vitro Technique Prostheses and Implants Tissue engineering
• Palabras claves:flujo de perfusión, día, viabilidad celular, gen relacionado, célula endotelial microvascular, centro de andamio, ingeniería de tejidos óseos, célula endotelial co, cultivo, expresión génica hipóxica
• Keywords:perfusion flow, day, cellular viability, related gene, microvascular endothelial cell, center of scaffold, bone tissue engineering, endothelial cell co, culture, hypoxic gene expression