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Artículo

Silica/OCP Affects the Viability of Osteoblasts through ROS-Induced AutophagyEl sílice/OCP afecta a la viabilidad de los osteoblastos a través de la autofagia inducida por ROS

Resumen

Objetivo. Explorar los efectos de las nanopartículas de gel de silicona modificadas con fosfato octacálcico en la superficie (sílice/OCP) de polímeros sobre la proliferación de osteoblastos y la autofagia. Método. La sílice/OCP se preparó in vitro, y la calidad de la preparación de la muestra se comprobó mediante experimentos de caracterización. La línea celular de osteoblastos (hFOB1.19) se trató con sílice/OCP, inhibidor de la autofagia (3-metiladenina [3-MA]) y sílice/OCP 3-MA, respectivamente. La proliferación de las células hFOB1.19 se detectó mediante el kit de bromuro de metiltiazolildifenil-tetrazolio (MTT). La citometría de flujo se utilizó para detectar la apoptosis celular. El cambio en la expresión de las proteínas beclin1 y P62 en las células hFOB1.19 se observó mediante Western blot. Se utilizó un kit de detección de ROS para detectar el contenido de especies reactivas del oxígeno en las células hFOB1.19. Resultados. La sílice/OCP era una esfera con un tamaño de partícula de 50 nm a 130 nm y presentaba una fase OCP en las técnicas de microscopía de proyección de electrones y difracción de rayos X. Los resultados indicaron que el OCP había modificado con éxito la sílice y que el material se había preparado con éxito. Un ensayo con MTT y citometría de flujo mostró que la viabilidad celular de las células tratadas con sílice/OCP aumentaba significativamente (P<0,05), y el fenómeno de apoptosis intracelular disminuía significativamente (P<0,05) en comparación con el grupo de control. Además, la inhibición de la viabilidad celular y la promoción de la apoptosis causada por el inhibidor de la autofagia 3-MA puede ser rescatada. El Western blot demostró que el nivel proteico de beclin1 en los osteoblastos alcanzó el máximo tras seis horas de tratamiento con sílice/OCP, y el nivel proteico de p62, la proteína sustrato de la autofagia, alcanzó el mínimo. Al mismo tiempo, el tratamiento de las células con el inhibidor de la autofagia 3-MA y sílice/OCP 3-MA descubrió que los niveles de proteína de beclin1 y p62 en el grupo de sílice/OCP 3-MA se ajustaron de nuevo en comparación con el grupo 3-MA. Después de añadir el inhibidor de la autofagia, el contenido de oxígeno reactivo en la célula aumentó significativamente (P<0,05) en el grupo sílice/OCP. En presencia de los inhibidores del oxígeno reactivo intracelular catalasa y sílice/OCP, la viabilidad celular de los osteoblastos fue significativamente inferior a la del grupo sílice/OCP, pero significativamente superior a la del grupo sílice/OCP 3-MA. El nivel de apoptosis del grupo de sílice/OCP catalasa también fue significativamente inferior al del grupo de sílice/OCP 3-MA (P<0,05), pero fue significativamente superior al del grupo de sílice/OCP (P<0,05). Conclusiones. Las nanopartículas de sílice/OCP pueden aumentar el nivel de autofagia en los osteoblastos y promover su proliferación.

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