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UHPLC-PDA Assay for Simultaneous Determination of Vitamin D3 and Menaquinone-7 in Pharmaceutical Solid Dosage FormulationEnsayo UHPLC-PDA para la Determinación Simultánea de Vitamina D3 y Menaquinona-7 en Formulación Farmacéutica de Dosis Sólida

Resumen

En el presente estudio se optimizó un método recientemente desarrollado basado en cromatografía líquida de ultra alto rendimiento (UHPLC) para la determinación simultánea de vitamina D3 y menaquinona-7 (MK-7) en formulación de comprimidos. La separación por UHPLC de la vitamina D3 y la MK-7 se realizó con una columna ACE Excel 2 C18-PFP (2 μm, 2,1 × 100 mm) a un caudal de 0,6 mL min-1, mientras que la fase móvil consistió en metanol/agua (19:1, v/v, fase A) y alcohol isopropílico (99,9%, fase B) con un 0,5% de trietilamina. La separación isocrática de ambos analitos se realizó a 40°C bombeando las fases móviles A y B en la proporción de 50:50 (v/v, pH, 6.0). Ambos analitos se detectaron a una longitud de onda de 265 nm y el volumen de inyección fue de 1,0 μL. El tiempo total de ejecución por muestra fue de 4,5 min con un tiempo de retención de 1,26 y 3,64 min para la vitamina D3 y MK-7, respectivamente. La curva de calibración fue lineal de 5,0 a 100 μg mL-1 para la vitamina D3 y MK-7 con un coeficiente de determinación (R2) ≥ 0,9981, mientras que la repetibilidad y la reproducibilidad (expresadas como desviación estándar relativa) fueron inferiores a 1,46 y 2,21%, respectivamente. El método HPLC propuesto demostró ser sencillo y rápido para la determinación de vitamina D3 y MK-7 en comprimidos.

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